常规血生化检查哪些项目(血液生化检查方法)
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生化试剂的分类
01
根据化学性质分类
1.酶类：包括alt、ast、ALP、ACP、r-gt、-hbdh、LDH、CK、CK-MB、-Amy、MSO、ada、che等。
2.底物/代谢物：包括TG、TC、HDL-C、LDL-C、UA、尿素、Cr、Glu、TP、ALB、T-BIL、TBA、NH4、CO2等。
3.无机离子：包括钙、磷、镁、氯等。
4.特殊蛋白：包括载脂蛋白a1、载脂蛋白B、脂蛋白(A)、C3、C4、PFB(B因子)、IgG、IgA、IgM等。
02
根据临床应用分类
1.无机离子：包括钙、磷、镁、氯等。
2.肝功能：包括ALT、AST、r-GT、ALP、MSO、T-Bil、D-Bil、TBA、TP、Alb等。
3.肾功能：尿酸、尿素、肌酐等。
4.心肌酶谱：CK、CK-MB、LDH、-HBDH、AST、MSO。
5.糖尿病：GLU等。
6.前列腺疾病：ACP、p-ACP等。
7.胰腺炎：-AMY。
8.血脂：总胆固醇、甘油三酯、HDL-C、LDL-C、载脂蛋白A1、载脂蛋白b、脂蛋白(a)。
9.痛风：UA。
10.有机磷中毒：ChE。
1.免疫疾病：C3、C4、pfb(因子b)、IgG、IgA、IgM、链、链。
维护技巧
按反应速度可分为终点试剂和动力学试剂。动力学试剂可分为零级动力学法和一级动力学法。
01
终点试剂
终点法是指反应经过一段时间(通常是几分钟)，反应完成，使所有底物(被测物质)转化为产物。它被称为终点法，或者更准确地说是平衡法，是最理想的分析类型。参见图(1)。
整个反应达到了平衡。因为正向反应的平衡常数很大，可以认为被测物质已经全部转化为产物，反应溶液的吸光度不再增加(或减少)。吸光度增加(或减少)的程度与被测物质的浓度成正比。
终点法对反应条件(如酶量、pH、温度)的微小变化不敏感，只要这种变化在一定时间内不影响反应的平衡。它是最理想的反应模型。
属于终点法的试剂主要包括：
TG、TC、HDL-C、LDL-C、UA、Glu、TP、Alb、T-Bil、D-Bil、Cr(氧化酶法)、NH4、CO2、Ca、p、Mg、Cl、apoA1、apoB、Lp(a)、C3、C4、PFB(B
02
动力学试剂
1.零级动力学方法
零级动力学法是指反应过程中反应速度保持不变并达到最大值，与底物浓度无关。因此，在整个反应过程中，反应物可以匀速生成某种产物，导致被测溶液的吸光度在某一波长处均匀减小或增大。下降或上升的速度(A/min)与被测物质的活性或浓度成正比，主要用于酶活性的测定。参见图(2)。
实际上，由于底物浓度不可能足够大，随着反应的进行，底物消耗到一定程度后，反应速度不再保持不变，从开始反应到达到最大速度需要一段时间。所以零级动力学法是针对特定时间的，每个试剂供应商对这个时间都有严格的规定。
属于零级动力学方法的试剂主要包括：
谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、碱性磷酸酶、r-GT、-HBDH、乳酸脱氢酶、CK、CK-MB、-AMY、MSO、ADA、ChE、TBA等。
2.一级动力学方法
在一定的反应时间内，反应速度与底物浓度的一阶成正比。因为底物是不断消耗的，所以整个反应速度是不断降低的，说明吸光度增加(或降低)的速度越来越小。这种反应达到平衡需要很长时间，理论上可以随时监控。但由于血清成分复杂，反应初期反应复杂，杂反应多。有必要延迟一段时间后进入稳定反应期。参见图(3)。
在固定的时间间隔内，底物浓度的变化与底物的初始浓度成正比，这是一级反应的均一性。在此期间吸光度的增加或减少与被测物质的浓度成正比。
属于一级动力学法的试剂主要有Cr(苦味酸法)和尿素(紫外监测法)。
彩色显影原理
主要有以下显色系统：
NAD-NADH和NADP-NADPH系统
磷-氮和磷-钠系统
H2O2偶联指示系统
抗原反应指示系统
Oth
NADH和NADPH在340nm处有特征吸收峰，而NAD和NADP在340nm处没有特征吸收峰。利用它们偶联的脱氢酶(工具酶)反应，根据340nm处吸光度的变化，可以确定物质的浓度或活性。
乳酸脱氢酶、MDH酶、GLDH酶和G6PDH酶通常用作这一指标体系的工具酶。
目前该指标体系测定的临床项目有：ALT、AST、CK、LDH、CK-MB、-HBDH、Glu、尿素、NH4、CO2等。
02
磷-氮和磷-钠系统
P-NP和p-NA在405nm处有特征吸收峰。根据405nm处吸光度的变化，可以确定物质的浓度或活性。
目前该指标体系测定的临床项目有ALP、ACP、r-GT、AMY等。
03
NAD-NADH和NADP-NADPH系统
H2O2在过氧化物酶的作用下，可将单一或成对的无色色原体氧化成有色色素，使其在某一波长的吸光度增加，因此可用于测定物质的浓度或活性。
在该指示系统中使用的单一颜料是TMB、ABTS等。成对颜料原酚和4AA、MBTH、DMA等。
目前，该指标体系所衡量的临床项目包括TC、TG、HDL-C、LDL-C、Glu、Cr、UA等。
04
抗原反应指示系统
特异性抗体在相应的缓冲环境中与抗原(待测物质)反应生成抗原抗体复合物，形成一定的浊度，导致特定波长的透光率发生变化。在抗体过量的前提下，变化程度与抗原浓度成正比。
目前，该指标体系测定的临床项目包括载脂蛋白AI、载脂蛋白b、脂蛋白(a)、IgG、IgA、IgM、C3、C4、CRP等。
05
抗原反应指示系统
蛋白质的肽键在碱性溶液中能与铜离子反应生成紫红色络合物，在一定浓度范围内显色反应强度与蛋白质的浓度成正比。用于总磷的测定。
在非离子去污剂BRIJ-35存在下，溴甲酚绿(BCG)能与白蛋白形成绿色络合物。用于测定白蛋白。
重氮苯磺酸盐与胆红素反应生成红紫色的偶氮胆红素。用于测定总胆红素和直接胆红素。
甲基百里酚蓝(MTB)在碱性条件下能与钙、镁形成有色络合物。用于测定钙和镁。
绩效评估方法
01
主要性能指标
1.稳定性：指在规定条件下储存一段时间后，仍能达到相应的性能指标，如空白吸光度、线性范围、灵敏度等。
2.反应灵敏度：指被测物质与单位浓度(或活性)反应产生的反应程度。反应程度越高，灵敏度越大。
3.精度：结果的一致性。
4.准确性：与参考测定程序的结果一致。
5.线性范围：在规定的重复性和线性偏差下，测量的浓度或活度值与设定的浓度或活度值之间的比例关系的范围。
6.基质效应：基质是指样品中除分析物以外的成分。基质通常会严重干扰分析物的分析过程，并影响分析结果的准确性。比如溶液的离子强度会影响分析物的活度系数，这些影响和干扰称为基体效应。
7.其他：试剂/样品比、反应时间、价格等。
02
绩效评估方法
1.稳定性：持续观察和日常测试；热加速试验。
2.反应灵敏度：直接计算单位浓度反应物的吸光度变化或变化率。
3.精度：根据NCCLS EP5-A。
4.精确度：根据NCCLS EP9-A2。
5.线性范围：根据NCCLS EP6-A。
6.基体效应：通过回收试验确定。
7.抗干扰：根据NCCLS EP7-A。
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