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无论是溶栓、经皮冠脉介入治疗(PCI),还是冠脉旁路移植术(CABG),均有一定风险,故正确诊断"冠心病、急性心肌梗死(AMI)"就显得至关重要。长期以来,临床工作者一直致力于寻

无论是溶栓、经皮冠脉介入治疗(PCI),还是冠脉旁路移植术(CABG),均有一定风险,故正确诊断"冠心病、急性心肌梗死(AMI)"就显得至关重要。长期以来,临床工作者一直致力于寻找高敏感性和高特异性的生物指标,以期提高诊断正确性。过去几十年来,曾经有多种生物指标在临床应用,从天冬氨酸氨基转移酶到乳酸脱氢酶,再到肌酸激酶、心肌肌酸激酶同工酶、肌红蛋白,最后到心肌肌钙蛋白(cTn)、高敏心肌肌钙蛋白(hs-cTn),其对心肌损伤检测的敏感性和特异性越来越高。

hs-cTn可以检出非常微小的心肌损伤,是目前公认的高敏感性和高特异性的指标,为众多指南所推荐。下面我们一起来了解cTn的发现、检测方法及其临床意义。

一. cTn的发现

要了解cTn,首先先来认识一下cTn的发现者——江桥节郎(图1)。

图1. 肌钙蛋白的发现者江桥节郎(S.Ebashi)。

早在二十世纪五十年代,横纹肌粗细肌丝的滑动模型学说已经提出,但还不清楚其原理。1965年,日本学者江桥节郎首次发现新的物质,即cTn,终于将这一理论阐述清楚。cTn存在于全身横纹肌,由C、T、I三个亚单位组成。cTn结合于原肌凝蛋白上,组成肌钙蛋白-原肌凝蛋白复合体。当cTn未与钙离子结合时,这个复合体阻挡粗肌丝上的横桥和细肌丝结合,相当于一块"挡路石"。当cTn与钙离子结合,这个"挡路石"移开,横桥和细肌丝结合并扭动,肌肉收缩(图2)。

图2. 肌钙蛋白生理功能示意图。

cTn的发现在生理学界引起巨大轰动,但当时似乎并没看到什么临床应用前景。直到20年之后,Roger和Michael Wilkinson发现心肌的cTnT、I这两个亚单位和其他部位横纹肌cTn来自不同的基因,抗原性明显不同。当心肌损伤时,游离于胞浆内的少部分cTnI快速释放入血循环,随后更多cTnI和cTnT从坏死的肌纤维中游离到胞浆内并释放入血循环。能不能用血清中心肌cTn检测心肌受损?这确实是个很聪明的想法,这引发了随后20年心肌酶学检测的一场革命。

二. cTn的检测方法

1989年在Katus等的努力下,第一份诊断AMI的心肌cTnT(cTnT)试剂诞生。在早期,cTnT采用多克隆抗体包被载体的酶联免疫吸附法(ELISA)检测,精密度较差,只能定性,不能定量。因此初期一般只能检测出cTn阳性或阴性,作为CKMB之外的一种血清学辅助判定手段。

随着抗体制备技术、酶联免疫技术发展,又出现了单克隆抗体包被载体、化学发光法、免疫荧光法等,所能检测的精确性越来越高,可以实现定量分析。在不到10年内,cTn以其更高的敏感性、特异性以及更长的检测窗口期而迅速得到临床医生的认可。在2000版的全球AMI统一定义中其地位已经超越CKMB,被推荐为首选的心肌酶学指标,成为最可靠的心肌酶学标志物,2007版、2012版的全球AMI统一定义推荐hs-cTn作为心肌酶学诊断指标。这里有一点需要注意,肌钙蛋白存在于全身横纹肌中,这里简称的cTn其实是特指心肌肌钙蛋白。

三. cTnT和cTnI的区别

1992年第一份cTnI商业检测试剂在临床推广,不久cTnT检测试剂也开始在临床应用,但在随后十余年引发了一场旷日持久的大争论,cTnT和cTnI孰优孰劣?早期曾有研究观察到,在慢性肾功能衰竭患者中经常出现cTnT增高,却不一定有急性冠脉综合征(ACS)。随后提出了几个可能的学说:①慢性肾功能衰竭患者中cTnT在横纹肌表达再分布;②抗原交叉反应;③慢性肾功能不全引发心肌微损害。第一个假说很快被cTnT阵营否定,有学者用PCR检测否定cTnT在慢性肾功能衰竭患者表达异常。随着第二代cTnT检测方法推出,抗原交叉反应得到较好解决。慢性肾功能不全心肌微损害也同样会引起cTnI增高。目前倾向认为cTnI和cTnT在AMI诊断敏感性和特异性上没有很大区别。

但是相对而言,有个问题显得更加重要,自cTnI检测方法问世以来,没有经过垄断的专利生产过程,不同厂家、不同免疫检测方法,始终未能形成统一的全球质量标准,只有企业质量标准,可比性较差,而cTnT是罗氏公司专利生产,标准比较统一。这可能是两大阵营论战当中诸多结论相互矛盾的主要原因。由于巨大的市场份额和不同商业利益,要求不同厂家按照统一模式生产目前看来并不现实。这样看来我们确实不必要花太多精力一定要在cTnT和cTnI之间分出伯仲。另外,cTn不但没有统一的全球质量标准,它的单位表达也各不相同,目前推荐统一使用ng/L作为cTn标准单位。

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